仪器用具：

    微量离心机

    冰浴

    Mupid II 迷你电泳槽及铸胶器

    UV transilluminator 及影像分析系统

    防护面罩

 

    药品试剂：

    限制酶：BamHI, HindIII （20 U/μL, BioLabs）

    10×NE Buffer BamHI （0.1 M Tris-HCl, pH 7.9; 0.1 M MgCl2; 1.5 M NaCl; 10mM dithiothreitol）

    100×BSA （10 mg/mL bovine serum albumin） 使用前稀释十倍成10×无菌水

 

    方法步骤：

    1） 正反应株，接种于3 mL LB/Amp 培养基，于37℃震荡培养过夜后，以2.1 的方法抽取质体。

    2） 每一株每反应各取3 μL 质体，另取pQE31 及pBlueGus 每反应各3 μL，分别依下表进行HindIII 及BamHI 切割。

    3） 以1% agarose gel 进行电泳分析，由电泳图谱挑选带有gus DNA 片段的重组质体。

??  照相后的电泳胶片不要丢掉，可继续进行Southern 转印。

    限制酶分析请依照下列表格加入：

     # 各管置请于37℃反应至少1 h。