方法步骤：
1） 尿素洗过夜的转印纸再以10 mL PBST 洗三次，每次约10 min，均在上述方形培养皿中进行。
2） 转印纸放在明胶NET 溶液中反应，置室温中反应1 h。一般使用方形培养皿当容器，但亦可装入塑料袋中反应，较节省试剂用量。
3） 反应后，以PBST 浸洗二次。
4） 把转印纸放在抗体溶液中反应，置室温反应1 h。
5） 反应后以PBST 洗三次，改用酶联体反应，在室温下反应1 h。
6） 以PBST 洗四至五次，注意容器也要洗干净。
7） 加入DAB 基质溶液约10 mL 呈色，尽量避光，并且不时摇动呈色液。
8） 数分钟内可呈色，在背景加深前倒去DAB，以水冲过数次后晾干。

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